(Ang daloy ng cytometry, ang FCM) ay isang cell analyzer na sumusukat sa intensity ng fluorescence ng mga marker ng cell. Ito ay isang high-tech na teknolohiya na binuo batay sa pagsusuri at pag-uuri ng mga solong cell. Mabilis nitong masukat at maiuri ang laki, panloob na istraktura, DNA, RNA, protina, antigens at iba pang mga pisikal o kemikal na katangian ng mga cell, at maaaring batay sa koleksyon ng mga pag -uuri na ito.
Ang daloy ng cytometer higit sa lahat ay binubuo ng mga sumusunod na limang bahagi:
1 Flow Chamber at Fluidics System
2 Laser Light Source at Beam Shaping System
3 Optical System
4 Electronics, Storage, Display at Pagsusuri System
5 Cell Sorting System
Kabilang sa mga ito, ang laser excitation sa laser light source at beam form system ay ang pangunahing pagsukat ng mga signal ng fluorescence sa daloy ng cytometry. Ang intensity ng ilaw ng paggulo at oras ng pagkakalantad ay nauugnay sa intensity ng signal ng fluorescence. Ang laser ay isang magkakaugnay na mapagkukunan ng ilaw na maaaring magbigay ng solong-haba ng haba, mataas na intensidad, at pag-iilaw ng mataas na estado. Ito ay ang perpektong mapagkukunan ng ilaw ng paggulo upang matugunan ang mga kinakailangang ito.
Mayroong dalawang cylindrical lens sa pagitan ng mapagkukunan ng laser at ang daloy ng silid. Ang mga lente na ito ay nakatuon ng isang laser beam na may isang pabilog na cross-section na inilabas mula sa mapagkukunan ng laser sa isang elliptical beam na may mas maliit na cross-section (22 μm × 66 μm). Ang enerhiya ng laser sa loob ng elliptical beam na ito ay ipinamamahagi ayon sa isang normal na pamamahagi, tinitiyak ang pare -pareho na intensity ng pag -iilaw para sa mga cell na dumadaan sa lugar ng pagtuklas ng laser. Sa kabilang banda, ang optical system ay binubuo ng maraming mga hanay ng mga lente, pinholes, at mga filter, na maaaring mahahati sa dalawang pangkat: pataas at agos ng daloy ng silid.
Ang optical system sa harap ng daloy ng silid ay binubuo ng isang lens at pinhole. Ang pangunahing pag-andar ng lens at pinhole (karaniwang dalawang lente at isang pinhole) ay upang ituon ang laser beam na may isang pabilog na cross-section na inilabas ng mapagkukunan ng laser sa isang elliptical beam na may isang mas maliit na cross-section. Ipinamamahagi nito ang enerhiya ng laser ayon sa isang normal na pamamahagi, tinitiyak ang pare -pareho na intensity ng pag -iilaw para sa mga cell sa buong lugar ng pagtuklas ng laser at pag -minimize ng pagkagambala mula sa naliligaw na ilaw.
Mayroong tatlong pangunahing uri ng mga filter:
1: Long Pass Filter (LPF) - Pinapayagan lamang ang ilaw na may mga haba ng haba na mas mataas kaysa sa isang tiyak na halaga na maipasa.
2: Short -Pass Filter (SPF) - Pinapayagan lamang ang ilaw na may mga haba ng haba sa ibaba ng isang tukoy na halaga upang maipasa.
3: BandPass Filter (BPF) - Pinapayagan lamang ang ilaw sa isang tiyak na saklaw ng haba ng haba na dumaan.
Ang iba't ibang mga kumbinasyon ng mga filter ay maaaring magdirekta ng mga signal ng fluorescence sa iba't ibang mga haba ng haba sa mga indibidwal na photomultiplier tubes (PMT). Halimbawa, ang mga filter para sa pagtuklas ng berdeng fluorescence (FITC) sa harap ng PMT ay LPF550 at BPF525. Ang mga filter na ginamit upang makita ang orange-red fluorescence (PE) sa harap ng PMT ay LPF600 at BPF575. Ang mga filter para sa pagtuklas ng pulang fluorescence (CY5) sa harap ng PMT ay LPF650 at BPF675.
Ang daloy ng cytometry ay pangunahing ginagamit para sa pag -uuri ng cell. Sa pagsulong ng teknolohiya ng computer, ang pag -unlad ng immunology at ang pag -imbento ng monoclonal antibody na teknolohiya, ang mga aplikasyon nito sa biology, gamot, parmasya at iba pang mga larangan ay lalong lumaganap. Kasama sa mga application na ito ang pagsusuri ng cell dynamics, cell apoptosis, pag -type ng cell, diagnosis ng tumor, pagsusuri ng pagiging epektibo ng gamot, atbp.
Oras ng Mag-post: Sep-21-2023
